Introduction

L’ADN est une molécule dans laquelle sont conservées les caractéristiques héréditaires d’un organisme. Cet article propose d’en expliquer les grands principes et nous explique comment l’extraire. L’extraction de l’ADN est une technique qui isole l’ADN à partir d’une cellule en quantité et en qualité suffisante pour permettre son analyse (par exemple).

Le Projet

L’ADN est une molécule dans laquelle sont conservées les caractéristiques héréditaires d’un organisme. Dans la cellule au repos l’ADN est associé à un grand
nombre de protéines dans le noyau. Des petites protéines appelées histones, présentes uniquement dans le noyau cellulaire eucaryote, permettent à l’ADN de se plier et s’envelopper sur lui-même.

De cette façon se forme un caillot compact appelé chromatine à l’intérieur du noyau de la cellule.

L’ACIDE DÉSOXYRIBONUCLÉIQUE (ADN)

L’ADN est une double-hélice droite, composée de deux brins complémentaires. Chaque brin d’ADN est constitué d’un enchaînement de nucléotides, eux-mêmes composés de bases azotées, de sucres (désoxyribose) et de groupements phosphate. On trouve quatre nucléotides différents dans l’ADN : A,G,C qy
T, du nom des bases correspondantes. L’information génétique est inscrite dans l’ordre dans lequel s’enchaînent les quatre nucléotides.

EXTRACTION DE L’ADN

L’extraction de l’ADN est une technique qui isole l’ADN à partir d’une cellule en quantité et en qualité suffisante pour permettre son analyse.

MATÉRIEL

 100 grammes grammes de pulpe des fruits mous
 chlorure de sodium
 jus d’ananas
 éthanol
 eau distillée
 1 éprouvette graduée
 1 bécher
 1 éprouvette de 20 ml
 1 éprouvette de 50 ml
 1 passoire
 conteneurs et cuillères pour couper et écraser les fruits

PROCÉDURE

1. Préparation de la solution d’extraction pour décomposer la structure
cellulaire
2. Digestion des protéines avec du jus d’ananas
3. Précipitation de l’ADN avec de l’éthanol

1. Préparation de la solution d’extraction pour décomposer la
structure cellulaire

 Peser 3 g de chlorure de sodium et les mettre dans le cylindre gradué
de 100 ml. Le chlorure de sodium, dissocié en ions Na+ et Cl- actes sur
les histones
 Préparer 10 ml de détergent et verser dans le cylindre avec le chlorure de sodium. Le détergent agit sur les membranes de la cellule, le noyau et la cellule elle-même.
 Ajouter de l’eau distillée pour un volume de 100 ml. Bien agiter pour dissoudre le sel
 Prendre environ 100 grammes de pulpe de fruits le mettre dans un bol et écraser avec une fourchette
 Verser la boue obtenue dans la solution d’extraction
 Attendez au moins 5 minutes pour la solution d’extraction à prendre effet sur les cellules du fruit
 Filtrer le mélange dans un bécher avec filtre propre

2. Digestion des protéines avec du jus d’ananas

 Prélever 25 ml du filtrat et le placer dans le tube 50 ml
 Ajouter 5 ml de jus d’ananas et bien agiter.
Dans le jus d’ananas est contenue la broméliane, une substance qui
décompose les protéines, en particulier les histones lié à l’ADN.
La digestion des protéines signifie rompre les protéines jusqu’à obtenir les
acide aminés
 Attendez quelques minutes afin que la broméliane contenue dans
le jus d’ananas agit sur les protéines.

3. Précipitation de l’ADN avec de l’éthanol

 Prélever 6 ml de la solution et le transfert à un tube de 20ml
 Ajouter un volume égal d’éthanol froid (mettre l’alcool dans le congélateur une heure en avance). Verser l’éthanol le long de la paroi du tube afin de former une couche sur la surface du filtrat. L’ADN qui est en contact avec l’éthanol précipite.
 Immédiatement des bulles de gaz se forment. Attendez jusqu’à ce
que le phénomène se termine.

À ce stade, vous pouvez voir dans l ’interface eau - l’alcool une
substance transparente qui augmente progressivement : il est l’ADN. L’ADN a été d’abord dissous dans l’eau est maintenant en contact avec de l’éthanol ; dans cet environnement de l’ADN n’est pas soluble et donc il devient visible.

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